EJEMPLO DE ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL

En una célula de ADN artificial integrada de manera deliberada in vitro por la desunión de secuencias de ADN provenientes de dos organismos distintos que normalmente no se encuentran juntos.
Estas técnicas se emplean para la síntesis de proteínas en gran escala, ya que podemos hacer que una bacteria produzca una proteína humana y lograr una superproducción, como en el caso de la insulina humana, que es elaborada por bacterias en grandes recipientes de cultivo, denominados biorreactores.
PASOS:
-Se aisló y se cortó el gen productor de la insulina humana del resto de ADN humano.
-Se insertó dicho gen en la bacteria Escherichia coli.
-Se potenció la multiplicación de las E. coli transgénicas que producían insulina en cultivos bacterianos para obtener un gran número de ellas.
-De esa población de E. coli se extraía la insulina producida.

Se fabricó gracias a la tecnología recombinante medicamento llamado Exubera, es una insulina de acción rápida humana producida por ADN recombinante en forma de polvo para ser inhalada. La insulina inhalable que al alcanzar el espacio alveolar, atraviesa los neumocitos por transcitosis, y llega a la circulación sanguínea. Pero que fue retirada del comercio por su alto costo, y por ser menos eficaz que la insulina inyectable.

BIBLIOGRAFIA:

http://naukas.com/2012/01/05/exitos-transgenicos-la-insulina/

http://www.redalyc.org/pdf/1812/181220509063.pdf

EJEMPLO DE ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

La recombinación genética es un proceso que lleva a la obtención de un nuevo genotipo a través del intercambio de material genético entre secuencias homólogas de DNA de dos orígenes diferentes. La información genética de dos genotipos puede ser agrupada en un nuevo genotipo mediante recombinación genética. La recombinación de eucariotas comúnmente se produce durante la meiosis como entrecruzamiento cromosómico entre los cromosomas apareados. Enzimas llamadasrecombinasas catalizan las reacciones de recombinación natural. RecA, en la Escherichia coli que es responsable de la reparación de las roturas en el ADN de doble hebra. En levaduras y otros microorganismos se requieren 2 recombinasas: Proteína RAD51 para recombinación mitótica y meiótica y la proteína DMC 1 de la recombinación meiótica.

Existen varios tipos de recombinación genética en eucariotas y son :

· Recombinación homóloga (profase I meiosis)
· Entrecruzamiento cromosómico (anafase I meiosis)
· Cambio de clase de inmunoglobulinas (IgM – IgG)
· Recombinación específica de sitio (virus – bacteriófago T4 y plásmidos)
· Recombinación no homologa ( células de mamíferos)

Bibliografia:

Roman D. Ingeniería genética o tecnología del ADN recombinante.[Internet].2015 [citado 29 Noviembre 2015].Disponible en:

http://www.ivu.org/spanish/trans/ssnv-genetic.html

PRUEBA MOLECULAR PARA DIAGNOSTICAS DIABETES MELLITUS

Southern 

El método tipo Southern o Southern blot fue desarrollado para la detección de genes específicos en el ADN celular. El ADN es digerido con una enzima de restricción y los fragmentos son separados por tamaños mediante electroforesis en un gel. A continuación los fragmentos de ADN de doble cadena son desnaturalizados mediante un proceso químico separando las dos hebras componentes del ADN en sus cadenas sencillas. Posteriormente, el ADN inserto en el gel es transferido a un filtro de nitrocelulosa, con lo que en el filtro queda representada una réplica de la disposición de los fragmentos de ADN presentes en el gel. A continuación el filtro se incuba durante un tiempo con la sonda marcada (radio activamente o con un fluorocromo); durante la incubación la sonda se va hibridando con las moléculas de ADN de cadena sencilla de secuencia complementaria (o muy parecida). La sonda unida al fragmento de ADN complementario se puede visualizar en el filtro de una forma sencilla mediante una exposición a una película de rayos X para el caso de sondas radiactivas o con una película sensible a la luz, para el caso de sondas con fluorocromo.
BIBLIOGRAFIA:
http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revista/00001975archivorevista.pdf#page=5

PRUEBAS DE TAMIZAJE Y CONFIRMATORIAS PARA DIABETES MELLITUS

Las pruebas de tamizaje son procesos que permiten la detección temprana de factores de riesgo, infección asintomática o estadios tempranos de una enfermedad clínica, por lo tanto permite un diagnostico e intervencion de tratamiento temprano. Estas son:
-Glucemia de ayuno
-Glucemia 2 horas postcarga de glucosa.

Las pruebas confirmatorias nos permiten diagnosticas si esta presenta la enfermedad y estas pueden ser:
-Hemoglobina glucosilada A1c(HbA1c)
-Glucometria capilar realizada mediante glucometro.

BIBLIOGRAFIA:

Carlos M, John E, Iván D. Guías de practicas clínicas basadas en evidencias sobre el tamizaje, diagnostico y tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2. 2007; pag 3-6. Disponible en:

http://www.diabetes.unal.edu.co/Guias_DM2.pdf

MICRORNAs INTERFERENTES EN LA DIABETES MELLITUS

Existen estudios realizados in vivo e in vitro que muestran que los microARN se requieren para el desarrollo del páncreas, para la regulación de la glucosa, contribuyen en el control de las células β-pancreáticas maduras y tienen un papel especial en la diferenciación de los islotes pancreáticos. Además, participan en la regulación de la producción, secreción y acción de la insulina. Existen datos que indican que la cantidad de microARN (miR-146a, miR-21, miR-29a, miR-34a, miR-222 y miR-375) se expresa en diferente proporción en las células β-pancreáticas, en el tejido adiposo y en el músculo esquelético de modelos animales con diabetes mellitus tipos 1 y 2. En modelos animales se ha demostrado que hay correlación entre la alteración de la expresión de los microARN y el desarrollo de diabetes. Kong y asociados estudiaron la presencia de miR-9, miR-29a, miR-30d, miR-34a, miR-124a, miR-146a y miR-375 en pacientes con diabetes tipo 2 de diagnóstico reciente, Individuos prediabéticos e individuos susceptibles con tolerancia normal a la glucosa. Demostraron que miR-34a tuvo una diferencia significativa y la expresión de los siete microARN relacionados con diabetes estuvo elevada en forma significativa en pacientes con diabetes comparados con los prediabéticos y con los individuos susceptibles con tolerancia normal a la glucosa.

BIBLIOGRAFÍA:

María R. Gloria V. y  Diego R. Importancia de los microARN en el diagnóstico y desarrollo de enfermedades.[Internet].2014 [citado 1 Noviembre 2015].Disponible en: 

http://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2014/im143n.pdf